口腔/咽拭子基因組DNA快速提取試劑盒

Rapid Swab DNA Kit

保存條件：本試劑盒在室溫儲(chǔ)存 12 個(gè)月不影響使用效果. 蛋白酶 K 可室溫運(yùn)輸，建議-20℃長(zhǎng)期保存。

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒采用特制的進(jìn)口DNA 吸附柱和*的緩沖液系統(tǒng)，特別適合于從口腔咽拭子中分離純化基因

組DNA。各種來源樣品裂解消化處理后 DNA 在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜（特

別配備了 Carrier RNA 可以從體系中輕松捕獲微量核酸），再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，將鹽、

細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的基因組 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。純化后的

DNA 無雜質(zhì)和 PCR 抑制劑，可直接適用于PCR 分析。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

• 配備了 Carrier RNA 用于充分收集特別微量DNA。
• 提取的 DNA 純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，可適用于各種常規(guī)操作，包括 PCR、酶切、測(cè)序、Southern 雜交等。

注意事項(xiàng)：

1. 結(jié)合液 CB 或者抑制物去除液 IR 低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀，可以在 37℃水浴幾分

鐘幫助重新溶解，恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。

2. 避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中發(fā)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化。

3. Carrier RNA

1） Carrier RNA 使用方法：如果起始處理量很少（口腔咽拭子上收集到的細(xì)胞很少），我們推薦使用 Carrier RNA，如果預(yù)期有較大量 DNA 產(chǎn)量，用戶可以根據(jù)需要選擇是否加入 Carrier RNA。使用時(shí)每個(gè)樣品提取所需結(jié)合液 CB 中加入 1μl Carrier

RNA 儲(chǔ)存溶液， 將結(jié)合液 CB 與 Carrier RNA 溶液充分顛倒混勻即可(結(jié)合液 CB 容易起泡沫,請(qǐng)勿使用渦旋振蕩混勻)。也可根據(jù)樣品數(shù)量，在總共需要的結(jié)合液CB 中加入總共需要的 Carrier RNA 混勻備用。混合液在室溫 24 小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

• Carrier RNA 加入過多造成 DNA 洗脫液中 Carrier RNA 濃度過高，下游 PCR 反應(yīng)可能受干擾，加入過少可能并不能幫助提高 DNA 產(chǎn)量和 PCR 敏感度，因此加入量應(yīng)該在具體試驗(yàn)中調(diào)整以得到-*佳效果。

自備試劑：無水乙醇

操作步驟：

提示：第-*次使用前請(qǐng)先在15ml 漂洗液 WB 中加入 60ml 無水乙醇，充分混勻，加入后請(qǐng)及時(shí)在方框

打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入!

取樣：取一根醫(yī)用消毒棉簽（手不要碰觸脫脂棉部位），伸進(jìn)口腔，緊靠臉頰內(nèi)側(cè)來回刮拭20 次（不

時(shí)旋轉(zhuǎn)棉棒），需充分接觸口腔粘膜。

注意事項(xiàng)：避免用手觸及棉簽，采集前可先用清水輕輕漱口。為防止樣本被食物或者飲料污染，取樣前

30 min 內(nèi)應(yīng)該避免進(jìn)食或者飲水。

1. 用剪刀將棉簽部分從其桿上剪下，放入2ml 離心管中，加入400μl 裂解液 ML。

2. 再加入 20μl 的蛋白酶 K (20mg/ml)溶液，立刻渦旋振蕩充分混勻，56℃放置 30 min，期間每 10 min 渦

旋混勻 10 sec。

3. 加入 400μl 結(jié)合液 CB，立刻渦旋振蕩充分混勻，70℃放置 10 min（擠壓去除拭子， 將盡可能多的裂

解液轉(zhuǎn)移至新的離心管中）。

如果拭子上細(xì)胞數(shù)量少，導(dǎo)致提取的基因組 DNA 產(chǎn)量過低, 可以在400μl 結(jié)合液CB中加入 1μl Carrier RNA 儲(chǔ)存溶液。

4. 冷卻后加 200μl 無水乙醇，立刻渦旋振蕩充分混勻。簡(jiǎn)短離心以除去管蓋內(nèi)壁的液滴，收集所有的液體

到管底。（如果周圍環(huán)境高于 25℃,乙醇需要冰上預(yù)冷后再加入）